美國(guó)ABI7500熒光定量PCR儀

  ABI7500快速型實(shí)時(shí)定量PCR儀是特異性靶基因檢測(cè)與定量的一體化平臺(tái)。7500將PCR熱循環(huán)，熒光檢測(cè)和各種應(yīng)用分析軟件結(jié)合在一起，可以動(dòng)態(tài)觀察PCR每一循環(huán)各反應(yīng)管中PCR擴(kuò)增產(chǎn)物逐漸增加的情況。PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)束后可以馬上得到定量結(jié)果，無(wú)需凝膠電泳分析，無(wú)需純化PCR產(chǎn)物，無(wú)需進(jìn)行任何實(shí)驗(yàn)操作。7500型實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀采用96孔反應(yīng)板或單個(gè)及8聯(lián)管，反應(yīng)體積25-100微升，實(shí)驗(yàn)可以在不到2小時(shí)內(nèi)結(jié)束。與其他人工基因定量分析方法如NorthernblottingorRNase-protectionassays相比，7500型實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)具有時(shí)間省，靈敏度高，準(zhǔn)確性好和線性范圍寬等優(yōu)點(diǎn)。7500型實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)由實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)的*—美國(guó)應(yīng)用生物系統(tǒng)公司于2004年1月推出，它質(zhì)量?jī)?yōu)異，實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可信，性能價(jià)格比極其*。

實(shí)時(shí)定量PCR應(yīng)用廣泛，包括基于相對(duì)定量分析的基因表達(dá)分析，以標(biāo)準(zhǔn)曲線為基礎(chǔ)的病原體定量分析，定性的PCR擴(kuò)增后核酸序列的SNP基因型分析，以及以陽(yáng)性內(nèi)對(duì)照為基礎(chǔ)的陽(yáng)性/陰性結(jié)果判定

?五色熒光檢測(cè),應(yīng)用更廣泛全面，包括：基因表達(dá)分析，病原體定量分析，SNP基因型分析以及以陽(yáng)性內(nèi)對(duì)照為基礎(chǔ)的陽(yáng)性/陰性結(jié)果判定
?新型光路設(shè)計(jì)支持更多的熒光標(biāo)記檢測(cè)，包括：FAM?/SYBR?GreenI,VIC?/JOE,NED?/TAMRA?/Cy3?,ROX?/TexasRed?,和Cy5?;
更好的激發(fā)光源設(shè)計(jì)使長(zhǎng)波長(zhǎng)紅色熒光的檢測(cè)靈敏度大大提高
?強(qiáng)大而靈活的反應(yīng)板設(shè)置指南軟件使反應(yīng)板設(shè)置非常方便，良好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示與自動(dòng)分析工具使實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的分析處理更簡(jiǎn)單直觀
?型半導(dǎo)體熱循環(huán)系統(tǒng)支持96孔板和單一0.2ml反應(yīng)管。
?將來(lái)可以升級(jí)至超速定量PCR反應(yīng)模式，大大縮短定量PCR反應(yīng)時(shí)間
?體積小，采用手提電腦或臺(tái)式電腦，適用于任何空間的實(shí)驗(yàn)室。

快速熱循環(huán)
     7500型實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)的標(biāo)準(zhǔn)模式采用25-100微升反應(yīng)體積，可以采用96孔板或單管/8聯(lián)管進(jìn)行實(shí)驗(yàn)反應(yīng)。另外7500還可以升級(jí)為快速熱循環(huán)樣品基座，該升級(jí)為選購(gòu)件，由AB公司工程師負(fù)責(zé)安裝。快速熱循環(huán)樣品基座采用新型96孔反應(yīng)板，這種反應(yīng)板的管內(nèi)液體上方的空間較小，可以支持5-30微升反應(yīng)體積的實(shí)驗(yàn)。采用樣品基座升級(jí)后的7500，新型96孔反應(yīng)板和新型快速熱循環(huán)定量PCR預(yù)混試劑，實(shí)時(shí)定量PCR實(shí)驗(yàn)可以在40分鐘內(nèi)完成，實(shí)驗(yàn)效果與標(biāo)準(zhǔn)2小時(shí)模式**。

7500型實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)軟件采用WindowsXP?操作系統(tǒng)，進(jìn)行儀器控制，數(shù)據(jù)收集和數(shù)據(jù)分析，軟件功能強(qiáng)大，界面友好，包括如下特色：
*反應(yīng)板設(shè)置指南，使實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)非常簡(jiǎn)單，即使是復(fù)雜的多重定量實(shí)驗(yàn)也是如此。
*擴(kuò)增反應(yīng)曲線的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)
*自動(dòng)設(shè)定熒光基線，自動(dòng)計(jì)算熒光閾值使實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析大大簡(jiǎn)化
*采用標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行靶基因的定量
*基因表達(dá)相對(duì)定量軟件提供強(qiáng)大的結(jié)果分析顯示，可以自動(dòng)將多達(dá)10塊96孔板基因表達(dá)實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)同時(shí)分析，并自動(dòng)去除無(wú)關(guān)項(xiàng)數(shù)據(jù)，該軟件為選購(gòu)件
*自動(dòng)SNP分型軟件以直觀的圖表輸出分型結(jié)果并自動(dòng)進(jìn)行分型質(zhì)量評(píng)分
*解離曲線數(shù)據(jù)采集操作簡(jiǎn)單觀察方便，可以在儀器運(yùn)行時(shí)觀察解離曲線數(shù)據(jù)
*觀察實(shí)時(shí)擴(kuò)增曲線時(shí)可以非常方便的標(biāo)定所對(duì)應(yīng)的樣品孔位置
*光源使用時(shí)間監(jiān)測(cè)及儀器系統(tǒng)自我診斷程序

熒光信號(hào)檢測(cè):
ABI7500快速型實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)的全部96個(gè)樣品孔采用同一鹵鎢燈作為光源，鹵鎢燈光通過(guò)五色光源濾光片后激發(fā)每一個(gè)分析樣品。鹵鎢燈光源增加光源濾光片后改善了長(zhǎng)波長(zhǎng)紅色熒光標(biāo)記的激發(fā)效果，可以大大提高紅色熒光檢測(cè)的靈敏度和定量分析的準(zhǔn)確性。激發(fā)后的熒光再通過(guò)五色熒光濾光片到達(dá)CCD照相機(jī)檢測(cè)信號(hào)。五色熒光濾光片能夠有效地分辨包括：FAM?/SYBR?GreenI,VIC?/JOE,NED?/TAMRA?/Cy3?,ROX?/TexasRed?和Cy5?在內(nèi)的多種熒光染料。

儀器性能:
7500型實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)經(jīng)過(guò)驗(yàn)證可以達(dá)到如下性能目標(biāo)：
?9個(gè)數(shù)量級(jí)的線性范圍
?可以檢測(cè)50ul反應(yīng)體積單一報(bào)告熒光TaqMan實(shí)驗(yàn)中僅10個(gè)起始拷貝數(shù)的模板，其置信度高達(dá)99.7%
 
試劑與消耗品:
7500型實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)可使用全套定量PCR試劑與消耗品，包括：TaqMan?PCR通用預(yù)混試劑,SYBR?GreenI預(yù)混試劑,96孔反應(yīng)板及0.2ml反應(yīng)管
TaqMan?Assays-on-Demand?andTaqMan?Assays-by-Design?應(yīng)用試劑盒:
美國(guó)應(yīng)用生物系統(tǒng)公司為7500型實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)提供各種配套的TaqMan定量PCR應(yīng)用試劑盒,這些試劑盒均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量控制，可以拿來(lái)直接使用。